篇一 生物實驗報告比較過氧化氫酶和fe3+的催化效率250字
一、實驗目的
1.初步學會探索酶的催化效率的方法。
2.探索過氧化氫酶和Fe3+催化效率的高低。
二、實驗原理
新鮮的豬肝中含有過氧化氫酶，F(xiàn)e3+是一種無機催化劑，它們都可以催化過氧化氫分解
成水和氧
三、材料用具
新鮮的質量分數(shù)為20%的豬肝研磨液、滴管、試管、火柴、試管架、質量分數(shù)為3.5%的氯化鐵溶液、體積分數(shù)為3%的過氧化氫溶液。
四、實驗過程（見書Ｐ30）您正瀏覽的文章由()整理，版權歸原作者、原出處所有。
五、討論
實驗時為什么要選用新鮮的豬肝？在滴入豬肝研磨液和氯化鐵溶液時能否公用一個吸管？為什么？
篇二 生物實驗報告觀察植物細胞的質壁分離與復原500字
一、實驗目的
1. 初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實驗原理
當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分就透過原生質層進入外界溶 液中，使細胞壁和原生質層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時，原生質層就會與細胞壁逐漸分離開，也就是分升了質壁分離當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分就透過原生質層進入細胞液中，整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài)，使植物細胞逐漸發(fā)生質壁分離復原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實驗過程（見書Ｐ60）
物理實驗報告 ·化學實驗報告 ·生物實驗報告 ·實驗報告格式 ·實驗報告模板
五、討論
1．如果將洋蔥表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？
2．當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發(fā)生質壁分離現(xiàn)象？為什么？
3．畫一個細胞在正常狀態(tài)下到經過0.3g/ml蔗糖溶液處理，再經過清水處理的細胞變化的一系列模式圖。
篇三 醫(yī)院微生物實驗室安全管理自查報告1050字
醫(yī)院微生物實驗室安全管理自查報告范文
為加強醫(yī)院病原微生物實驗室生物安全管理工作，確保醫(yī)院平安目標的實現(xiàn)，我院檢驗科根據(jù)____省《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關內容，對醫(yī)院實驗室安全管理工作進行了自查，對涉及病原微生物菌(毒)種及樣本的人員進行了培訓，提高他們生物安全的意識，掌握必要的生物安全知識。
一、實驗室生物安全管理工作、各項規(guī)章制度的運行情況
醫(yī)院檢驗科根據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關規(guī)定進行學習，并定期對有關生物安全各項規(guī)章制度的運行情況進行檢查，對存在的問題及時進行整改。實驗室所從事的實驗活動均嚴格遵守有關的國家標準和實驗室技術規(guī)范、操作規(guī)程，并指定專人監(jiān)督檢查實驗室技術規(guī)范和操作規(guī)程的落實情況。同時，對檢查情況進行詳細記錄，定期召開會議討論工作中發(fā)現(xiàn)的問題，及時糾正。
二、病原微生物菌(毒)種的管理及運輸
因各方面條件限制我院現(xiàn)不能開展病原微生物實驗室生物的檢查，根據(jù)通知要求積極組織相關人員主要學習了：病原微生物實驗室菌(毒)種的'管理嚴格登記制度，收到菌(毒)種后立即進行編號登記，詳細記錄菌(毒)種的名稱、來源、特性、用途、批號、傳代日期、數(shù)量。在菌(毒)種的管理，安全保衛(wèi)制度，安全保衛(wèi)措施，保管過程中，傳代、分發(fā)及使用，均應及時登記，定期核對庫存數(shù)量。菌(毒)種在進行銷毀時，滅菌指示標志，滅菌效果，同時做好銷毀登記等內容。
三、實驗室生物安全突發(fā)事件的處理工作
在此次自檢中，我院實驗室對以前制訂的處置意外事件的應急指揮和處置體系，進一步進行了修訂，使之能滿足實際工作的需要。
針對當發(fā)生自然災害(如地震、水災等)或設施出現(xiàn)故障時，我們制定了可能遇到的緊急情況及其處理原則。
同時規(guī)范了菌(毒)種外溢在臺面、地面和其他表面的的處理原則、皮膚刺傷(破損)的處理原則、離心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報告制度。
在實驗室的顯著位置張貼了實驗負責人、實驗室工作人員、消防、醫(yī)院、公安、工程技術人員、水、電氣維修部門電話。
四、提高意識，加強學習
組織檢驗人員對《病原微生物實驗室生物安全管理條例》進行全面系統(tǒng)的學習，同時加強了實驗室的準入制度的管理，標明實驗室類型、負責人及其聯(lián)絡方式。加強了個人安全防護，并要求檢驗人員嚴格遵守標準的操作規(guī)程進行檢驗。
通過這次對微生物實驗室生物安全管理工作自查，提高了全體檢驗人員對微生物實驗室生物安全管理工作重要性的認識，加強管理，采取有效措施，確保實驗室工作安全。
篇四 生物學實驗報告4450字
關于生物學實驗報告
劉希偉201100140041分子生物學實驗報告
質粒dna的提取、純化及檢測
姓名：___學號：2011001400__年級：20__級生物基地班 實驗日期：2023年9月16日—30日組別：6組 同組者：__
一、實驗目的
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質粒dna的原理和方法。
2、學習并掌握凝膠電泳進行dna的分離純化的實驗原理。
3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學習并掌握凝膠中dna的分離純化方法。
二、實驗原理
1、質粒dna的制備方法
質粒（plasmid）是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈dna分子，分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中，但在細菌細胞中含量最多。細菌質粒大小介于1～200kb之間，是應用最多的質粒類群，在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質粒自身的dna。
質粒dna的制備包括3個步驟：①培養(yǎng)細菌，使質粒dna大量擴增；②收集和裂解細菌；③分離和純化質粒dna。主要方法包括：堿裂解法：0。2molnaoh+1%sds；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；sds裂解法：10%sds，一般用于質粒大量提取。在實際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質粒分子大小、堿基組成和結構等特點以及質粒dna的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質粒dna。
2、質粒dna的提取——堿變性提取法
在細菌細胞中，染色體dna和質粒dna均被釋放出來，但是兩者變性與復性所依賴的溶ph值不同。在ph值高達12。0的堿性溶液中，染色體dna的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性；共價閉合環(huán)狀質粒dna的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用ph值4。6的kac（naac）高鹽溶液調節(jié)堿性溶液至中性時，變性的質粒dna可恢復原來的共價閉合環(huán)狀超螺旋結構而溶解于溶液中；但染色體dna不能復性，而是與不穩(wěn)定的大分子rna、蛋白質—sds復合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心，與復性的溶于溶液的質粒dna分離。溶于上清液的質粒dna，可用無水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于dna和rna性質類似，乙醇沉淀
dna的同時，也伴隨著rna沉淀，可利用rnasea將rna降解。質粒dna溶液中的rnasea以及一些可溶性蛋白，可通過酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質粒dna。
3、凝膠電泳進行dna分離純化
電泳（electrophoresis）是帶電物質在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定ph條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質，它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會發(fā)生移動，移動的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異，就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化dna的片段，是分子生物學的核心技術之一。
凝膠電泳技術操作簡單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中dna的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，eb）或sybr gold染色直接觀察到，甚至含量少至20pg的雙鏈dna在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話，這些分離的dna條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實驗。
分子生物學中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質電泳。它的分辨率非常高，長度上相差1bp或質量上相差0。1%的dna都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行dna序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進行電泳，并能容納較大的dna上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物，由β—d—吡喃半乳糖與3，6—脫水—l—吡喃半乳糖組成，相對分子質量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬bp），小片段dna（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定dna的相對分子質量，分離經限制酶水解的dna的片段，進一步純化dna等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負電荷，在電場中向正極移動。dna在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素：樣品dna分子的大小、dna分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。
三、實驗材料
1、實驗儀器
培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管（eppendorf管）、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號筆、手套等。
2、實驗試劑
lb培養(yǎng)基，抗生素ap（氨芐青霉素），溶液ⅰ，溶液ⅱ，溶液ⅲ，rnasea母液，te緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（pci）混合液，預冷無水乙醇，tae電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（eb），dna相對分子質量標準物dna marker λ/hind ⅲ，5mol/l ph 5。2的醋酸鈉。
四、實驗步驟
1、準備實驗
配制lb液體培養(yǎng)基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配lb固體培養(yǎng)基；準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個 ，將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。
2、菌體培養(yǎng)
在含有ap的lb平板上挑取一環(huán)攜帶有質粒puc19的e。coli dh5單菌落，接種于20mllb液體培養(yǎng)基中進行37℃振蕩過夜培養(yǎng)，培養(yǎng)基中加ap100ul
（100ug/ml），質粒puc19具有ap抗性基因，使得帶有puc19的質粒得以生長。 過夜培養(yǎng)后菌體量大，雜質較多，然后用移液槍吸取過夜培養(yǎng)物2ml轉接于50mllb液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中加入ap250ul，37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對數(shù)生長期后期，生長速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質少，適合提取質粒。
3、質粒提取
（1）稱量空的50ml離心管的重量為14。331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒?jié)M，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細胞。
（2）向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱重得14。437g，則菌體質量為106mg。
（3）洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細胞提前破裂，防止dna受機械剪切力作用而降解。edta是ca2+和mg2+等二價金屬離子的螯合劑，可抑制dnase的活性，抑制微生物的生長。tris—cl溶液提供適當?shù)膒h。
（4） 按比例加入新配制的溶液ⅱ2ml（與溶液ⅰ對應），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液ⅱ中的naoh使細胞膜發(fā)生了從bilayer（雙層膜）結構向micelle（微囊）結構的相變化導致細胞溶解。同時，強堿性使染色體dna、質粒dna和蛋白質變性；sds為下一步沉淀做鋪墊。
（5）按比例加入冰預冷的溶液ⅲ1。5ml（與溶液ⅰ、ⅱ對應），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質sds復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液ⅲ中的hac中和naoh，因為長時間的堿性條件會打斷基因組dna，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被pds共沉淀。同時變性的質粒dna復性。反應形成的高鹽環(huán)境進一步加速了沉淀。
（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側，用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3mnaac混勻，加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對dna很安全，因此是理想的沉淀劑。 dna溶液是dna以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易于聚合。在ph為8左右的溶液中，dna分子是帶負電荷的，加一定濃度的naac或nacl，易于互相聚合而形成dna鈉鹽沉淀。
（7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到dna沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。
（8）以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質粒呈淺黃色，隨著水分的減少質粒變?yōu)闊o色。所以為了完全溶解質粒，要在離心管上標記質粒所在位置。
（9）將dna沉淀溶于1mlte緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉移到一個eppendorf管中。te是ph緩沖液，為dna提供穩(wěn)定的生理狀態(tài)，呈弱堿性，有利于保護堿基對。同時含有edta是二價陽離子的螯合劑，抑制dna酶作用。
4、質粒純化
（1）eppendorf管中加入rnase a（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0。5—1h
（2）將上述的溶液平均分配到2個1。5ml的微量離心管中，每管0。5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的eppendorf管中。苯酚是經tris飽和后的，顯黃色。苯
酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無色，在中間產生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質。
（3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到到另一潔凈的eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑，但是苯酚留在質粒溶液中會影響dna的酶切，它本身易被氧化，會損傷質粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質粒中的脂類，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現(xiàn)的泡沫，有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質的存在。
（4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的eppendorf管中，得上清液400ul。
（5）向上清液中加入1/10體積的naac混勻，再加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。
（6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到dna沉淀，為白色。
（7）向dna沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應與收集沉淀面一致。
（8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulte溶解于1管中。
5、質粒檢測
（1）稱取0。4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標好液面位置，加入40ml的1×tae電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。
（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內。在槽內加入1×tae 電泳緩沖液，至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。
（3）電泳1h，觀察溴酚蘭的帶（藍色）的移動。
（4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進eb溶液中進行染色，完全浸泡約5min。
（5）凝膠成像儀觀察。
五、注意事項
（1）滴加溶液ii時，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動作要快，因為強堿在溶液中停留時間不能過長，否則會破壞質粒dna。
（2）加入溶液iii后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液iii中和強堿使質粒復性，不可劇烈震蕩， 防止染色體dna斷裂，應該上下顛倒離心管，使其混勻。
篇五 動物微生物及免疫學實驗的報告2800字
動物微生物及免疫學實驗的報告
一、實驗目的
（一）掌握一般培養(yǎng)基的制備原理及要求，掌握培養(yǎng)基酸堿度的測定，熟悉一
般培養(yǎng)基的制備過程和各種器皿滅菌方法。
（二）掌握細菌分離培養(yǎng)的基本要領和方法，掌握細菌抹片的制備方法和革蘭
氏染色法及油鏡的使用方法，并認識革蘭氏染色的反應特性。
（三）掌握學習用微生物學原理診斷疾病的一般方法及步驟。
二、實驗用品
（一）器材
量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號筆、接種環(huán)、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養(yǎng)箱、水浴培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡
（二）試劑及材料
肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內臟
三、實驗步驟
（一）培養(yǎng)基的制備
（所有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min，傾注平板在無菌操作臺內完成，并放在無菌操作臺內）
1、麥康凱培養(yǎng)基
（1） 組成：蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖
10g、0.01%結晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml
（2） 方法：將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中，調節(jié)
ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中，并加入乳糖，加熱熔化。將兩
液混合，分裝于燒瓶內，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌
15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，加入結晶紫和中性紅水溶液，搖勻后
傾注平板。
注：結晶紫和中性紅水溶液配好后需經高壓滅菌。
2、血清平板
（1） 組成：營養(yǎng)瓊脂、牛血清
（2） 方法：將滅菌的營養(yǎng)瓊脂加熱熔化，冷卻至45~50℃時，加入牛血清，并
混勻，傾注平板。
注：不得將牛血清一并加入后再滅菌。
3、lb培養(yǎng)基
（1） 組成：胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g
（2） 方法：在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉，
調節(jié)ph至7.4，加熱熔化，分裝于瓶中，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時，傾注平板。
4、液體培養(yǎng)基（在lb培養(yǎng)基的基礎上，裝入大試劑瓶中，不加瓊脂，不分裝）
（二）病料取材
在病豬死亡后，首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在，未發(fā)現(xiàn)，則立即用消毒的器械對其進行生理解剖，觀察其病理特征現(xiàn)象，取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物，并注意組織的完整性，用儲物袋密封保存。
（三）細菌粗培養(yǎng)
1、消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。
2、接種
（1） 在無菌操作臺酒精燈旁打開用儲物袋密封保存的病料，先左手持鑷子右
手持剪刀，把病料剪出一個小口。
（2） 右手持滅過菌的接種環(huán)，左手持平板，并用拇指、食指及中指將平皿揭
開約20左右，然后將接種環(huán)前端插入小口旋轉一下后，再用劃線接種的方法接種到一個血清平板上。
（3） 用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標記，并將平板倒放。
以此方法，分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上，各接種2個血清平板。
3、培養(yǎng)：將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中，反向培養(yǎng)24小時。 注：劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落，且劃線時接種環(huán)應盡量傾斜，以免劃破培養(yǎng)基（后同）；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。
（四）細菌純培養(yǎng)
1、菌落特征判斷
待粗培養(yǎng)的細菌培養(yǎng)24小時后，取出用放大鏡觀察記錄單個小菌落的形態(tài)特征并用實驗報告紙記錄好，并在平板底部上做好觀察標記，其形態(tài)特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。
2、取單個菌落進行革蘭氏染色鏡檢
（1） 取干凈的載玻片，用記號筆在其一面做好正反面標記，再在載玻片另一
面中央滴上一小滴蒸餾水。
（2） 將接種環(huán)在火焰上滅菌，待冷卻后，在酒精燈旁從標記的單個小菌落中
取少許細菌置于蒸餾水中混勻（同時蓋好平板倒扣置于一旁），用接種環(huán)涂成直徑約1.5cm的菌膜，再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細菌，待冷卻進行染色。
（3） 先滴加草酸結晶紫溶液染色1~2min，再水洗；然后滴加革蘭氏碘液溶液
染色1~2min，再水洗；隨后滴加95%的酒精脫色30~60s，再水洗；最后滴加稀釋的品紅進行復染30~60s，再水洗；待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。
（4） 將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下，滴加一滴松柏油進行鏡檢，觀察其
形態(tài)特征，判斷細菌的種屬。
3、細菌接種培養(yǎng)
（1） 消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實驗手套，再用消毒水對
無菌操作臺內桌面及用酒精燈外焰對待用器械進行火焰滅菌。
（2） 接種：右手持滅過菌的接種環(huán)，左手持平板，并用拇指、食指及中指將
平皿揭開約20左右，然后將接種環(huán)插入揭開的平板口內蘸去一下鏡檢標記的小菌落，再用劃線接種的方法接種到一個血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標記，將平板倒放。
（3） 將接種好的`平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中，反向培養(yǎng)24小時。
注：油鏡用完后應立即清理物鏡上的松柏油；劃線接種時盡量劃開，以保證長出單個菌落；待接種完畢后熄滅無菌操作臺內酒精燈，關閉好無菌操作臺窗口，打開無菌操作臺內的紫外燈。 。
（五）菌液的制備
1、鏡檢：用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢，觀察并記錄是否為純培養(yǎng)的細菌。
2、分裝液體培養(yǎng)基：先對無菌操作臺及需要使用的器械進行消毒滅菌，然后用鉗子揭開一個空試劑瓶，用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養(yǎng)基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶內，并立即蓋上液體培養(yǎng)基大試劑瓶瓶塞。
3、接種：右手持接種環(huán)，用火焰對其進行滅菌，待冷卻后，取出純培養(yǎng)的平板，在無菌操作臺內酒精燈旁，蘸去少許細菌，左手傾斜液體培養(yǎng)基，將接種環(huán)，伸入液體培養(yǎng)基內攪動，然后取出對接種火焰環(huán)滅菌，并用滅菌的包裝紙捆綁好后，用記號筆做好相應標記，置于一旁。
4、培養(yǎng)搖菌：將接種好的液體培養(yǎng)基置于水浴培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。 注：分裝一個培養(yǎng)基就接種一個培養(yǎng)基，不得全部分裝完后再一個一個接種。
（六）小鼠致病性實驗
1、保定：選擇健康的青壯年小白鼠，先用右手抓住尾巴，旋轉數(shù)周讓其眩暈，然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚，并翻轉左手，使其頭部朝下，以達到內臟前移的目的。
2、接種：先用酒精棉球蘸取酒精對注射部位擦洗消毒，再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。
3、觀察：將接種的小白鼠放在適宜的環(huán)境下生活，并在鼠籠處用記號筆標記好接種時間、菌種等。
4、再培養(yǎng)鑒定：待小白鼠死亡后，對其進行解剖，觀察其內臟病變情況，并取肝臟直接涂在相應培養(yǎng)基上，在適宜條件下反向培養(yǎng)24小時后，取菌落細菌進行鏡檢觀察判斷。
注：在注射小白鼠2小時候需要觀察小白鼠是否因注射時傷害到內臟而死亡。
動物微生物及免疫學實驗的報告
篇六 醫(yī)院生物實驗室安全自查報告900字
醫(yī)院生物實驗室安全自查報告
國家根據(jù)實驗室對病原微生物的生物安全防護水平，并依照實驗室生物安全國家標準的規(guī)定，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。新建、改建、擴建三級、四級實驗室或者生產、進口移動式三級、四級實驗室應當遵守下列規(guī)定：
（一）符合國家生物安全實驗室體系規(guī)劃并依法履行有關審批手續(xù)。
（二）經國務院科技主管部門審查同意。
（三）符合國家生物安全實驗室建筑技術規(guī)范。
（四）依照《______環(huán)境影響評價法》的規(guī)定進行環(huán)境影響評價并經環(huán)境保護主管部門審查批準。
（五）生物安全防護級別與其擬從事的實驗活動相適應。
前款規(guī)定所稱國家生物安全實驗室體系規(guī)劃，由國務院投資主管部門會同國務院有關部門制定。制定國家生物安全實驗室體系規(guī)劃應當遵循總量控制、合理布局、資源共享的原則，并應當召開聽證會或者論證會，聽取公共衛(wèi)生、環(huán)境保護、投資管理和實驗室管理等方面專家的意見。三級、四級實驗室應當通過實驗室國家認可。
國務院認證認可監(jiān)督管理部門確定的認可機構應當依照實驗室生物安全國家標準以及本條例的有關規(guī)定，對三級、四級實驗室進行認可；實驗室通過認可的，頒發(fā)相應級別的生物安全實驗室證書。證書有效期為５年。一級、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動，應當具備下列條件：
（一）實驗目的和擬從事的實驗活動符合國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門的規(guī)定。
（二）通過實驗室國家認可。
（三）具有與擬從事的實驗活動相適應的工作人員。
（四）工程質量經建筑主管部門依法檢測驗收合格。
國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門依照各自職責對三級、四級實驗室是否符合上述條件進行審查；對符合條件的，發(fā)給從事高致病性病原微生物實驗活動的資格證書。
取得從事高致病性病原微生物實驗活動資格證書的實驗室，需要從事某種高致病性病原微生物或者疑似高致病性病原微生物實驗活動的，應當依照國務院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門的規(guī)定報省級以上人民政府衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門批準。實驗活動結果以及工作情況應當向原批準部門報告。
篇七 微生物實驗報告1550字
微生物實驗報告模板
實驗室空氣微生物檢測
實驗室環(huán)境微生物的檢測
班級：生物工程123 姓名：趙家熙 學號：2012013409
摘要：空氣是人類賴以生存的必須環(huán)境，也是微生物借以擴散的媒介?？諝庵写嬖谥毦?、真菌、病毒、放線菌等多種微生物粒子，這些微生物粒子是空氣污染物的重要組成部分。而實驗室中的環(huán)境是更為重要的，對微生物的要求更加的高，一個好的實驗室環(huán)境可以讓實驗結果更加的精確。本實驗通過對實驗室空氣的采集，對微生物的培養(yǎng)及染色觀察來證明證明實驗室環(huán)境存在微生物，也證明無菌操作的重要性。
關鍵詞：實驗室環(huán)境，空氣，微生物檢測，革蘭氏染色，形態(tài)觀察
正文：
前言
實驗室空氣微生物含量多少可以反映該實驗室的空氣質量，需要測定空氣中的微生物數(shù)量和空氣污染微生物。實驗室的空氣中微生物越少，代表在該實驗室做微生物實驗的時候誤差會小，成功率會高。本實驗以牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)實驗室中的微生物，利用革蘭氏染色法及顯微鏡觀察實驗室中空氣中的微生物種類及形態(tài)。
1. 材料方法
1.1 實驗材料
1.1.1樣品來源
實驗室空氣
1.1.2藥品
氫氧化鈉（固體），牛肉膏，蛋白胨，瓊脂粉，nacl。
1.1.3耗材
培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基）無菌水，石棉網，電爐，酒精燈，培養(yǎng)皿，三角瓶，500ml燒杯，玻璃棒，超凈工作臺，ph試紙。
1.2方法
1.2.1取樣
采集實驗室空氣樣本
1.2.2制作培養(yǎng)基
在500ml燒杯內加水200毫升，放入牛肉膏1.0g、蛋白胨2.0g和氯化鈉1.0g，做記號，放在火上加熱，待燒杯內各組分溶解后，加入瓊脂4.0g，不斷攪拌以免粘底。停止加熱后冷卻，加入配置的naoh溶液調節(jié)ph值至7.2-7.5后倒入三角瓶。
1.2.3高壓滅菌
將培養(yǎng)皿和三角瓶用報紙及繩包裝后，利用高壓滅菌鍋將培養(yǎng)皿和裝有培養(yǎng)液的三角瓶高壓滅菌，121度維持20分鐘.
1.2.4分裝培養(yǎng)液及加入樣本
在超凈工作臺上將三角瓶中的培養(yǎng)液分裝到6個培養(yǎng)皿當中，等培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液冷卻凝固，將其中三個加入實驗室中的空氣樣本，二個加入超凈工作臺空氣，一個作為對照組。對照組a，實驗組b貼標簽做記號，倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
1.2.5革蘭氏染色，觀察其種類，形態(tài)
將培養(yǎng)好的帶有微生物菌落的培養(yǎng)基拿出，取干凈的載玻片于實驗臺上，在載玻片中央滴一滴無菌蒸餾水，將接種環(huán)在火焰上燒紅，待冷卻后從斜面挑取少量菌種與玻片上的水滴混勻后，在載玻片上涂布成一均勻的薄層，涂布面不宜過大。利用高溫，手持載玻片的一端，標本向上，在酒精燈火焰外層盡快的來回通過2~3次，共約2~3秒鐘，放置待冷后，進行染色。初染：用結晶紫染色1min后水洗，吸干。媒染：加碘液1min后水洗，吸干。脫色：用脫色液（95%乙醇）脫色30s，水洗，吸干。復染：用番紅
復染3min，水洗，吸干。待標本片干后置顯微鏡下，用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目標物后用油鏡觀察，注意細菌細胞的顏色。
2. 結果與分析
2.1 實驗結果
圖1 圖2
圖3 圖4
圖
5
圖6
2.2 分析
此次實驗實驗目的基本完成，但仍存在一些誤差。本實驗采取1個培養(yǎng)基無菌作為對照組，另外5個作為實驗組，3個采用實驗室空氣，2個采用超凈工作臺空氣（1）5個實驗組中，有一個培養(yǎng)皿沒有生長出細菌，由于倒培養(yǎng)基操作時培養(yǎng)液傾倒過少，導致無法滿足細菌生長代謝繁殖的所需能量。（2）如圖四，是培養(yǎng)皿中長出的細菌，經查詢，此細菌為呼吸道內的雜菌，由于操作時操作者不慎咳嗽將菌注入培養(yǎng)皿中。（3）如圖6 使用革蘭氏染色法，但鏡下觀察有重疊現(xiàn)象，制片時為徹底打散細菌。
3. 討論
本實驗除了略微操作失誤以外，其他良好，經討論，我們認為無菌操作時十分重要的，本實驗操作簡單，步驟清晰，答題沒有改動的地方，但在其中一個操作過程中，把培養(yǎng)皿直接放在教室中和超凈工作臺上是不可取的，導致上述分析中的
（2）失誤。我們應該更加注重無菌操作。
3. 參考文獻
．《公共場所空氣的微生物檢測報告》 孫艷萍
.《圖書館內外空氣微生物檢測及資源保護》 王伯秋
[3]. 《基礎生物學實驗技術》 主編：陳永富 哈爾濱工程大學出版社 2009
篇八 大學生物理實驗報告2250字
大學生物理實驗報告
風洞試驗綜合
一. 風洞試驗簡述：
實驗空氣動力學是空氣動力學的一個分支，是用實驗方法研究飛行器及其它物體在與空氣或其它氣體作相對運動時的氣動特性、運動規(guī)律和各種復雜物理現(xiàn)象。由于是直接研究物體與真實氣流間的相互作用，所得數(shù)據(jù)可以用作工程設計的依據(jù)，驗證理論計算結果并能揭示新的流動現(xiàn)象，為理論分析提供物理模型。
實驗空氣動力學作為一門分支學科是20世紀40年代形成的。它的形成同飛行器高速發(fā)展，要求迅速獲得大量復雜、精確、可靠的設計數(shù)據(jù)有關。它的主要內容除空氣動力學基礎理論外，還包括實驗理論、實驗方法和實驗設備的知識。
實驗空氣動力學的主要任務是利用風洞進行模型實驗，以發(fā)現(xiàn)和確認流動現(xiàn)象、探索和揭示流動機理、尋求和了解流動規(guī)律，并為飛行器提供優(yōu)良氣動布局和空氣動力特性數(shù)據(jù)，風洞實驗所依據(jù)的基本理論是相對運動原理和相似理論。
相對運動原理：無論是固體以某一均勻速度在靜止的流體中運動，還是流體以相同速度流經固體，兩者之間的相互作用力恒等。
相似理論：論述物理現(xiàn)象相似的條件和相似現(xiàn)象的性質的學說。是模擬的理論基礎。相似理論的重要課題是確定各種物理現(xiàn)象的相似準數(shù)。
風洞是進行空氣動力學實驗的一種主要設備，幾乎絕大多數(shù)的空氣動力學實驗都在各種類型的風洞中進行。風洞的工作原理是使用動力裝置在一個專門設計的管道內驅動一股可控氣流，使其流過安置在實驗段的靜止模型，模擬實物在靜止空氣中的運動。測量作用在模型上的空氣動力，觀測模型表面及周圍的流動現(xiàn)象。根據(jù)相似理論將實驗結果整理成可用于實物的相似準數(shù)。實驗段是風洞的中心部件，實驗段流場應模擬真實流場，其氣流品質如均勻度、穩(wěn)定度（指參數(shù)隨時間變化的情況）、湍流度等，應達到一定指標。
風洞實驗的主要優(yōu)點是：
① 實驗條件（包括氣流狀態(tài)和模型狀態(tài)兩方面）易于控制。
② 流動參數(shù)可各自獨立變化。
③ 模型靜止，測量方便而且容易準確。
④ 一般不受大氣環(huán)境變化的影響 。
⑤ 與其他空氣動力學實驗手段相比，價廉、可靠等。
缺點是難以滿足全部相似準數(shù)相等，存在洞壁和模型支架干擾等，但可通過數(shù)據(jù)修正方法部分或大部分克服。
風洞實驗的主要常規(guī)試驗有測力試驗、測壓試驗和流態(tài)觀測試驗等。測力和測壓試驗是測定作用于模型或模型部件（如飛行器模型中的一個機翼等）的氣動力及表面壓強分布，多用于為飛行器設計提供氣動特性數(shù)據(jù)。流態(tài)觀測試驗廣泛用于研究流動的基本現(xiàn)象和機理。
二. 實驗內容：
1. 根據(jù)風洞實驗段尺寸和實驗項目要求完成實驗模型的結構和模型支撐結構的設計。
2. 編寫模型測力和流動顯示實驗大綱（或實驗任務書）。
3. 固定風速，改變模型姿態(tài)（例如，改變模型迎角）測量不同姿態(tài)下的模型氣動力；對模型做重復性試驗。
4. 對測力模型做流動顯示實驗（分別做模型煙流顯示實驗和油流顯示實驗）
三. 實驗儀器及設備：
d1低速風洞主要組成部分為實驗段、擴壓段、拐角和導流片、穩(wěn)定段、收縮段以及動力段。實驗段截面為橢圓面，其入口長軸為102cm，短軸為76cm，出口處長軸為107cm，短軸為81cm；實驗段全長1.45m；實驗段的最大流速為50m/s；紊流度為0.3%；實驗段模型安裝區(qū)內，速壓不均勻度3%。其上游收縮段的收縮比為8.4。d1低速風洞采用可控硅控制無級調速；配置有尾撐式—機構及內式六分量應變天平。由信號放大器（gda—10），a/d模數(shù)轉換數(shù)據(jù)采集板和計算機構成測力天平信號數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)。
實驗原理：
當物體以某一速度在靜止的空氣中運動時，氣流對物體的作用與同一速度的氣流流過靜止物體時的作用完全相同。風洞就是一種產生人工氣流，對固定于風洞試驗段的模型產生氣動力作用的管道設備。
六分量應變天平：是一種專用的測力傳感器。用于測量作用在模型上的空氣動力的大小。該天平能測量升力、阻力、側力、俯仰力矩、偏航力矩和滾轉力矩。它由應變片、彈性元件、天平體和一些附件組成。應變天平是一種將機械量轉變?yōu)殡娏枯敵龅膶Ｓ迷O備。它是運用位移測量原理，利用天平的變形來測量外力大小。將應變片貼在天平彈性元件上，彈性元件上的應變與外力大小成比例，應變片連接組成測量電橋，接入測量線路中，即可測出力的大小。應變天平在測量過程中的`參量變化過程如下：
pruv
其中：
p—天平彈性元件上承受的氣動力。
—在氣動力p的作用下彈性元件上的應變。
r—貼在彈性元件上的應變片在彈性元件產生應變的情況下產生的電阻增量。
u—由應變片產生的電阻增量r而引起的測量電橋產生的輸出電壓增量（mv）。
v—檢測儀器所指示的讀數(shù)增量（v）。
右下圖為一六分量應變天平測量電橋示意圖。圖中標有號碼處為粘貼有電阻應變片的天平元件。例如號碼1、2、3、4為天平升力元件的四個電阻阻值相等的應變片，它們構成了一個全橋電路。當天平升力元件
受載后，在電橋ac端將會有電壓信號u輸出，
該信號u將被引入信號放大器。
信號放大器（gda—10）：其功用是將來自于天平
各分量電橋的微小電壓輸出放大到能被計算機接
受的電壓值。
a/d模數(shù)轉換數(shù)據(jù)采集板：由于計算機只能處理數(shù)
字信號，而天平各分量的輸出信號是模擬信號，因
此須先用a/d模數(shù)轉換數(shù)據(jù)采集板將天平輸出的模擬信號轉換成數(shù)字信號，方能由計算機對采集的信號數(shù)據(jù)進行處理。
計算機：通過已有程序軟件對試驗模型的測力進行過程控制、數(shù)據(jù)采集和后處理。 模型煙線流動顯示、表面油流顯示原理參見附錄1、2。
四. 實驗步驟：
1） 將實驗模型安裝于測力天平上。對試驗模型做水平或垂直調整。將模型的
攻角、側滑角分別調整為0角。
2） 檢查各有關設備之間的連線是否連接正確。
3） 打開計算機，然后是放大器及天平電源。
4） 通過計算機測力系統(tǒng)軟件檢測天平各分量的信號輸出值是否正常。通常未
篇九 生物實驗室述職報告模板1200字
時間過地飛快，忙忙碌碌中又過了一學年，在這一學年里，我一向以一名優(yōu)秀實驗員的標準要求自己，認真學習，努力工作，用心思考，力求在工作、學習上有進步，在教師修養(yǎng)上有提高，爭取做一名合格的實驗員。
在思想上，熱愛祖國，熱愛____，堅決擁護黨的領導及路線、方針、政策;提高認識，增強緊迫感、時代感、職責感，適應發(fā)展要求，強化“六個意識”：第一，強化自我充電意識;第二，強化科研意識;第三，強化信息網絡意識;第四，強化合作意識;第五，強化創(chuàng)新意識;第六，強化服務意識。
在工作上，踏實進取、認真謹慎，盡職盡責，對自己負責、對單位負責、樹立大局意識、服務意識、使命意識，努力把“全心全意為學校服務”的宗旨體此刻每個細節(jié)中;以改善工作作風、講求工作方法、注重工作效率、提高工作質量為目標，用心努力，較好地完成了全年的各項工作任務。
本學期生物實驗室的工作重點仍是為輔助生物理論教學的順利進行，開展好實驗教學。生物實驗具備培養(yǎng)學生觀察和動手潛力的功能，更有培養(yǎng)學生動腦、啟迪思維、開發(fā)潛能的作用，現(xiàn)將本學期生物實驗工作做如下總結：
一、隨著學期工作的結束，實驗室的維護與管理工作又將開始，為新學期理論教學工作的順利開展做好準備，實驗室的管理工作是一個不可缺的重要環(huán)節(jié)，個性是二線為教學服務的管理工作，是較零碎而不大起眼的工作。但是，在管理工作上，仍要將儀器進行科學規(guī)范管理。實驗室的儀器較多，繁雜。規(guī)范的管理可使人看上去就要有一種既科學又舒適的感覺。因此在原有的管理上，除了將儀器進行分門別類分柜，分層放置，儀器貼有標簽等外，按照管理和實驗的性能，將儀器進一步規(guī)范化，這樣一來教師使用方便，效率較高。
二、本學期期末仍要做好儀器防銹，防塵，防潮等工作，儀器使用以后防銹工作不可少的，個性是較精密的顯微鏡等儀器，每使用后，要認真清理和擦試鏡頭和有關活動的部件，然后裝入箱內保存，定期進行檢查，發(fā)現(xiàn)問題立即采取措施。讓所保管的所有儀器幾乎無銹、無塵和受潮現(xiàn)象。
三、認真做好儀器的維修工作。每一學期結束前，必須要將儀器進行全面清理和維修，為下學期做好充分準備工作。
四、輔助一線教師提高生物教學效果，優(yōu)質服務是二線工作人員的職責，也是學校發(fā)展的基礎。因此在實驗管理工作中，除了要熟悉教材，還要掌握分組實驗和演示實驗與教師任課的大致進度和時間，做好實驗的一切準備工作。
五、生物實驗室的工作屬二線管理工作，在工作中幾乎不會有較大的教學成果，工作壓力也不會有一線教師的那么大。但是，隨著社會的發(fā)展，學校的工作也會隨著發(fā)展和變化。因此在本學期完成任務的前提下，應充分利用余業(yè)時間學習專業(yè)知識和一些管理常識，不斷豐富自己，爭取早日像一線教師一樣站在最前線努力工作或使自己的管理工作更具特色，為以后的學校的發(fā)展做出應有的貢獻。
六、按時打掃實驗室衛(wèi)生，確保室內外的整潔。實驗室的整潔能夠讓任課教師和學生的情緒舒坦，是任課教師上課更有效率，學生學習更有激情。
篇十 食品微生物實驗報告3200字
食品微生物實驗報告
食品微生物實驗
霉菌的培養(yǎng)與形態(tài)學觀察：實驗一真菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
實驗目的：
（1）了解培養(yǎng)基的配置原理和方法，掌握分離培養(yǎng)微生物的有關準備工作。
（2）掌握高壓滅菌方法及原理
實驗原理：
（1）培養(yǎng)基的制備原理：
培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。
從營養(yǎng)角度分析：
營養(yǎng)：碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機鹽等；？適宜的酸堿度(ph值)和一定緩沖能力；？一定的氧化還原電位；？合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反復融化，其凝固性降低。
（2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌
在密閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內溫
度也隨之增加。在0.1mpa的壓力下，鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。
實驗材料與方法
配制培養(yǎng)基所需器材
實驗設備：高壓蒸汽滅菌器。
實驗器材：500ml三角燒瓶、藍蓋瓶、5ml刻度吸管、培養(yǎng)基、天平、砝碼、
稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。
培養(yǎng)基等集中放講臺前高壓桶內，送到洗刷室統(tǒng)一高壓滅菌條件及注意事項
高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養(yǎng)基113℃，15min。
倒平板電爐加熱滅菌好的培養(yǎng)基打開平皿包裝倒平板（10塊）注意事項：空氣環(huán)境無菌（應在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）。
a.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。
b.瓶口要過火焰。
c.左手掀開平皿小口。
d.傾注滿皿底再多一點，約10ml（7cm直徑平皿）。
e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養(yǎng)過程中污染雜菌。
f.完全凝固再翻轉平板放塑料筐內，4℃?zhèn)溆谩?/p>
分析與討論
（1）如何證明培養(yǎng)基滅菌是否徹底？
把滅菌后的培養(yǎng)基按滅菌鍋內的不同位置，每處抽取數(shù)管(瓶)，標上記號，置25℃～30℃培養(yǎng)一周左右進行檢查。如果培養(yǎng)基沒有什么變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養(yǎng)基出現(xiàn)了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導致蒸汽不暢，或鍋的結構不合理等原因所致，應根據(jù)上述情況進行改進；如果大部分或全部菌種瓶都出現(xiàn)雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時間不夠，應提高壓力或延長滅菌時間。經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。
經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。
（2）為什么說消毒與滅菌是微生物學和臨床醫(yī)學必不可少的基本知識？由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過不同途徑和媒介進入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對于切斷傳播途徑、預防和控制其感染具有重要意義。自古以來，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達到預防疾病的目的.。實際上，除了在臨床醫(yī)療實踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學實驗室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產等過程中都需要避免微生物的污染。
實驗二霉菌的接種與培養(yǎng)
實驗目的與要求：掌握霉菌與酵母菌的接種與培養(yǎng)方法。
實驗原理：
接種是微生物實驗及科學研究中一項基本操作技術。根據(jù)實驗目的和要求，
選擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的關鍵是無菌操作。
無菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進行，所有器皿均須嚴格消毒，培養(yǎng)基應事先做無菌試驗，
接種工具使用前后須經火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養(yǎng)四大類微生物時應注意選擇適宜的培養(yǎng)條件。多數(shù)細菌為專性需氧菌與兼性需氧菌，少數(shù)為厭氧菌。多數(shù)食品腐敗菌和工業(yè)用菌種，以及人和動物病原菌的最適生長溫度為37℃，并且在近中性（ph6.5～7.5）條件下生長良好。多數(shù)放線菌為好氧菌，少數(shù)為厭氧菌，最適生長溫度為28～30℃，多數(shù)適宜在偏堿性環(huán)境中生長（ph7.5～8.5）。
實驗材料與方法
（1）實驗材料：實驗設備：溫箱。
實驗器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、pda平板、高鹽察氏平板、高氏合成i號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。
（2）實驗方法：平板接種：毛霉→pda平板（點植法）
啤酒酵母→pda平板（五區(qū)分離劃線法）青霉、曲霉→pda平板（連續(xù)劃線法）
小室載玻片培養(yǎng)法：
1、取滅菌后小室平皿。
2、取無菌pda瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～1.0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養(yǎng)小室中的載玻片上，制作過程注意無菌。
3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養(yǎng)基四周，用無菌鑷子
將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并(轉載于:l滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標記，置28～30℃培養(yǎng)3～5d
糧食產品的平板接種：
1.取糧食樣品20g，放入無菌燒杯，加無菌水洗滌，
反復10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內備用2.鑷子取糧食種入pda瓊脂內，每皿可接種5-10粒。
放線菌的接種：取細黃鏈霉菌劃線法接種，在接種的劃線處，無
菌操作斜插入蓋玻片數(shù)張。
注意事項：
1.空氣環(huán)境無菌（應在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）
2.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。
3.接種環(huán)使用前，直接在酒精燈上燒灼滅菌，把環(huán)和金屬絲燒紅即可。
4.接種環(huán)使用后，先在火焰周圍把環(huán)上標本烤干，再燒灼滅菌，以免標本汽化，爆烈四濺，污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過火焰2－3次，殺滅表面微生物
分析與討論
1、糧食中產毒真菌的種類及產生毒素？
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細黃鏈霉菌（放線菌）青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細黃鏈菌素
2、常用霉菌培養(yǎng)基有哪些？
馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基
豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基
3、霉菌的接種方法有何不同？為什么？
（1）連續(xù)劃線法（青霉、曲霉）
青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應采用連續(xù)劃線接種法接種。（2）點植法（根霉、毛霉）
根霉與毛霉生長區(qū)域比較大，應采用點植法。（3）小室載玻片培養(yǎng)法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）
實驗三霉菌的制片與形態(tài)觀察
實驗目的：學習并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法；
了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線菌的基本形態(tài)特征。
實驗原理：霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多（約為3-10μm），常是細
菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大，細胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以制標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液，用此染液做霉菌制片的特點是細胞不變形，具有殺菌、__作用，不易干燥，能保持較長時間，能防止孢子四處飛散，棉蘭具有一定的染色作用，染液的藍色能增大反差。
實驗材料：
（一）菌種：在馬鈴薯瓊脂平板上培養(yǎng)3—4天的青霉(penicilliumsp.)、曲霉(aspergillussp.)、毛霉（mucorsp.）、根霉；
（二）器材及用具：鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。
實驗方法：
（一）直接制片觀察
于潔凈載玻片上，用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲，然后小心地蓋上蓋玻
片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡（二）小室培養(yǎng)觀察
將載玻片直接放低倍鏡下觀察，再換高倍鏡觀察。
觀察原則：
毛霉：用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形
狀、大小。
根霉：菌絲、孢子同毛霉，注意觀察有無假根。
曲霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子著生位置，辨認分生孢
子梗、頂囊、小梗和分生孢子。
青霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形狀等。實驗結果：
分析與討論：
青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同？
青霉常分布在霉腐變質的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上，菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結構，結構的每一個分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青綠色，進行孢子生殖。
曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中，曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀，球狀結構的表面放射狀地生有成串的孢子，孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。
從皮膚取材查真菌如何檢查？
食品微生物實驗
篇十一 初一學生物理實驗報告900字
“浮力消失”了
做下面的小試驗。
器材
找一個底面很平的容器，讓一個蠟燭頭緊貼在容器底部，再往容器里倒水，蠟燭頭并不會浮起來；輕輕地把蠟燭頭撥倒，它立刻就會浮起來。
可見，當物體與容器底部緊密接觸時，兩個接觸面間就沒有液體滲入，物體的下表面不再受液體對它向上的壓強，液體對它就失去了向上托的力，浮力當然隨之消失了。
現(xiàn)在，你能提出為潛艇擺脫困境的措施了嗎？
“浮力是怎樣產生的”，學生對“浮力就是液體對物體向上的壓力和向下的壓力之差”這一結論是可以理解的，但卻難以相信，因此做好浮力消失的實驗是攻克這一難點的關鍵，下面介紹兩種簡便方法。
[方法1]
器材：大小適當?shù)牟Ａ┒?化學實驗室有)一個、乒乓球一只、紅水一杯。
步驟：
(1)將乒乓球有意撳入水中，松手后乒乓球很快浮起。
(2)用手托住漏斗(喇叭口朝上，漏斗柄夾在中指和無名指之間)，將乒乓球放入其中，以大拇指按住乒乓球，將水倒入漏斗中，松開拇指，可見乒乓球不浮起，(這時漏斗柄下口有水向下流，這是因為乒乓球與漏斗間不太密合)。
(3)用手指堵住出水口，可見漏斗柄中水面逐漸上升，當水面升至乒乓球時，乒乓球迅即上浮。(若漏斗柄下口出水過快，可在乒乓球與漏斗接觸處墊一圈棉花，這樣可以從容地觀察水在漏斗柄中上升的情況。)
[方法2]
器材：透明平底塑料桶(深度10cm左右，口徑宜大些，便于操作)一只、底面基本平整的木塊(如象棋子、積木、保溫瓶塞等)一個、筷子一根、水一杯。
制作小孔桶：取一鐵扦在酒精燈上燒紅，在塑料桶底面中央穿一小孔、孔徑1cm左右，用砂紙將孔邊磨平即成一小孔桶。
步驟：
(1)將木塊有意撳入水中，松手后木塊很快浮起。
(2)將木塊平整的一面朝下放入小孔桶中并遮住小孔，用筷子按住木塊，向桶中倒水。移去筷子，可見木塊不浮起。(這時小孔處有水向下滴，這是因為木塊與桶的接觸面之間不很密合)。
(3)用手指堵住小孔，木塊立即上浮。
上述兩例針對實際中物體的表面不可能絕對平滑這一事實，巧妙地利用“小孔滲漏”使水不在物體下面存留，從而使物體失去液體的向上的壓力，也就失去了浮力，結果本應浮在水面上的乒乓球和木塊卻被牢牢地釘在了水底，不能不令學生嘆服。接著步驟(3)又魔術般地使浮力再現(xiàn)，更令學生情緒高漲，躍躍欲試。
學生自己觀察問題、解決問題。
篇十二 觀察洋蔥表皮細胞的生物實驗報告2150字
觀察洋蔥表皮細胞的生物實驗報告
一觀察洋蔥表皮細胞
實驗目的：通過觀察洋蔥表皮細胞，說明植物體是由細胞組成的實驗材料：：顯微鏡、洋蔥、鑷子、滴管、水、載玻片、針、蓋玻片、吸水紙、紗布。實驗步驟：
（一)制做臨時裝片。
（1）用紗布將載玻片、蓋玻片擦干凈。
（2）用液管在載玻片上滴一滴清水。
（3）用鑷子在洋蔥鱗片葉上撕下一小片表皮。
（4）將撕下的表皮放入載玻片上的水滴中，用針將其展開。
（5）用鑷子夾住蓋玻片，先將一邊接觸載玻片的水滴邊經再慢慢把蓋玻片放平，制成臨時切片。
（4）在蓋玻片的翼側滴加稀碘液，用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引，使染液浸潤標本的全部。
（二）安裝臨時裝片：將臨時切片放到顯微鏡上，調整顯微鏡與臨時切片位置，直到可以觀察到清晰的圖像為止實驗圖像：
200倍800倍
實驗結論：洋蔥表皮是由無數(shù)細胞構成的，有明顯的細胞核，細胞壁，細胞質出現(xiàn)。
二．觀察人的口腔上皮細胞的實驗教案
1、學習要求：
1.制作和觀察人的口腔上皮細胞臨時裝片。2.認識人的口腔上皮細胞的基本結構。
2、材料用具：
生理鹽水，稀碘液，消毒牙簽，滴管，紗布，鑷子，吸水紙，載玻片，蓋玻片，顯微鏡。
3、實驗方法和步驟：
1.用潔凈的紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干。2.在載玻片中央滴一滴生理鹽水。
3.用消毒牙簽在口腔內側壁輕刮幾下放在生理鹽水中。
4.用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，再將蓋玻片緩緩放平蓋在水滴。
5.在蓋玻片的一側滴加幾滴稀碘液，用吸水紙在蓋玻片的另一側吸引，使碘液浸潤標本的全部。
總結步驟：
擦-→滴-→取-→蓋-→染-→吸五、繪制人的口腔上皮細胞
三．測定某種食物中的能量
實驗目標一顆花生種子含有多少能量？
實驗器材或藥品 水
實驗探究過程 現(xiàn)象
分析及結論
1、在錐形瓶中裝30ml水
實驗前水溫：
2、把花生固定在解剖20℃、20℃、24℃
針上
試驗后水溫：
3、在酒精燈上點燃花73℃、78℃、68℃
4.2j生并盡快把花生放到錐
溫差：×51×4.2=6300j
形瓶下面 53℃、58℃、44℃ 、待花生完全燒完后，平均值：51.666℃
一顆花生種子約含有6300j
實驗結的能量論
四．探究饅頭在口腔中的變化實驗報告
一、問題的提出：取一塊饅頭放到口中咀嚼?？谇恢械酿z頭要經過牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及與唾液的混合。細細品嘗這時的饅頭，你能嘗出一些甜味來。饅頭變甜是否與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌有關呢？如果有關，它們各起什么作用呢？饅頭變甜是否是淀粉發(fā)生了變化？
二、作出假設饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關。饅頭變甜是因為淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成了帶有甜味的`麥芽糖。在這個過程中，通過牙齒的咀嚼將饅頭嚼碎，舌的攪拌使饅頭碎屑與唾液充分混合。
三、制定計劃（一）實驗原理
饅頭變甜應該是成分中糖類發(fā)生變化。饅頭的主要成分是淀粉，因此本實驗利用淀粉遇碘變藍的特性，以及口腔中的溫度為37℃的常識。控制變量唾液，以及模擬牙齒的咀嚼作用和舌的攪拌作用。三支試管，兩個對照實驗。一支試管作為實驗組，另兩支試管作為對照組。如果模擬牙齒的咀嚼功能、舌的攪拌功能并加入唾液，滴入碘液后，實驗組的試管內沒有變成藍色，說明饅頭中淀粉的變化與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關。如果變成藍色，則說明淀粉沒有被分解，饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌沒有關系。（二）實驗變量的控制
兩個對照實驗。一個對照實驗的實驗變量是唾液，實驗組內加入唾液2ml，對照組試管加入2ml清水。另一個對照實驗的實驗變量是饅頭塊的狀態(tài)：實驗組的饅頭塊用刀切碎，放入試管中并震蕩試管，對照組的饅頭塊不做任何處理，直接整塊放入試管中，并且不震蕩試管。
（三）實驗方案實驗材料用具：饅頭塊（三小塊等大）試管（三支）燒杯（三個）盛唾液的小燒杯滴管溫度計石棉網三腳架碘液小刀小木板
1.取新鮮的饅頭，切成大小相同的a、b、c三小塊。將a塊和b塊分別用刀細細地切碎，拌勻（模擬牙齒的咀嚼和舌的攪拌），c塊不做任何處理。
2.用涼開水將口漱凈，口內含一塊消毒棉絮。約1分鐘之后，用
干凈的鑷子取出棉絮，將棉絮中的唾液擠壓到小燒杯中。
3.取3支潔凈的試管，分別編上（1）、（2）、（3）號，然后做如下處理：
將a饅頭碎屑放入（1）號試管中，注入2ml唾液并震蕩試管；將b饅頭碎屑放入（2）號試管，注入2ml清水并震蕩試管；將c饅頭放入（3）號試管，不震蕩。將三支試管一起放入37℃左右的溫水中。4.5-10分鐘后，取出這三支試管，各滴加2滴碘液，搖勻。然后，觀察并記錄各試管中的顏色變化。四：實施計劃
按確定的探究計劃進行實驗，觀察實驗現(xiàn)象?？梢姡?）號試管中沒有變成藍色；（2）號試管變成藍色；（3）號試管中的饅頭塊部分變成藍色。
五、分析實驗結果，得出結論
分析實驗現(xiàn)象，（1）號試管中滴入碘液后，沒有變成藍色，說明試管中已經沒有淀粉，淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成麥芽糖了，麥芽糖沒有遇碘變藍的特性，所以滴入碘液后不變藍。（2）號試管中加入的是清水和饅頭碎屑，水沒有消化淀粉的作用，因此，滴入碘液后，饅頭碎屑中淀粉遇碘變成藍色。（3）號試管中只有部分變成藍色，說明饅頭與唾液的接觸不充分，只有部分淀粉被分解。由此，得出結論：說明饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關系。因為上述活動模擬了消化與唾液的分泌以及牙齒的咀嚼、舌的攪拌，（1）號試管中的饅頭接觸到了足量的唾液，并被消化。
篇十三 生物實驗報告格式850字
生物實驗報告格式
一、實驗目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。
二、實驗原理
1.還原糖的鑒定原理 生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基)，因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質量濃度為0.1 g/ml的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05 g/ml的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的'cu(oh)2沉淀。cu(oh)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的cu2o沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：
ch2oh—(choh)4—cho+2cu(oh)2→ch2oh—(choh)4—cooh+cu2o↓+2h2o
用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色 棕色 磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質的鑒定原理 鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g/ml的氫氧化鈉溶液(a)和質量濃度為0.01 g/ml(b)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(naoh)中，雙縮脲(h2noc—nh—conh2)能與cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應。
3.脂肪的鑒定原理 脂肪可以被蘇丹ⅲ染成橘黃色，被蘇丹ⅳ 染成紅色
三、實驗過程(見書p18)
四、實驗用品(見書p18)
五、注意
1.關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質的鑒定中先加雙縮脲a，再加雙縮脲b
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據(jù)是什么？
生物實驗報告格式
篇十四 大學生物化學實驗報告標準格式250字
大學生物化學實驗報告標準格式
實驗一 血清蛋白質醋酸纖維薄膜電泳
[目的][原理]
[儀器組成]
[操作與結果]
[結果粘貼]
實驗二 酶的特異性
[目的][原理]
[操作與結果]
將以上1、2、3號試管置于37℃水浴箱保溫10分鐘。然后向各管中加班氏試劑20滴，沸水中煮沸10分鐘，取出勿振搖試管，觀察結果并記錄。
[分析]三管結果及原因。
實驗三溫度、ph、激活劑、抑制劑
對酶反應的影響
[目的'][原理]
[操作與結果]
（一）溫度對酶反應的影響
[分析各管的顏色變化原因]
（二）ph對酶反應的影響
[分析各管的顏色變化原因]
篇十五 生物技術綜合實驗報告2350字
關于生物技術綜合實驗報告
四川大學-生物技術-綜合實驗報告-學生版
生物技術綜合實驗
甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-gcs)基因的克隆和原核表達
學生： 學號：
同實驗者：
<研究背景>;
谷胱甘肽(glutathione， gsh) gsh具有多種重要生理功能， 抗自由基和抗氧化應激作用， 保護細胞膜的完整性等。γ-gcs是植物細胞中gsh生物合成的限速酶， 可以調控gsh的生物合成量。gsh在生物體抵御冷害、干旱、重金屬、真菌等脅迫過程中起著重要作用， 說明γ-gcs也與植物抗逆過程密切相關。
實驗一 甘薯葉片rna提取
一、實驗目的
1. 了解真核生物rna提取的原理；
2. 掌握trizol提取的方法和步驟。
二、實驗原理
trizol 試劑是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的單相的快速抽提總rna的試劑，在勻漿和裂解過程中，能在破碎細胞、降解細胞其它成分的同時保持rna的完整性。trizol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞，使細胞中的蛋白，核酸物質解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質，但不能完全抑制rna酶活性，因此trizol中還加入了8－羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源rnase（rna酶）。0.1%的8－羥基喹啉可以抑制rnase，與氯仿聯(lián)合使用可增強抑制作用。異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質變性劑，可溶解蛋白質并使蛋白質二級結構消失，導致細胞結構降解，核蛋白迅速與核酸分離。β-巰基乙醇的主要作用是破壞rnase蛋白質中的二硫鍵。在氯仿抽提、離心分離后，rna處于水相中，將水相轉管后用異丙醇沉淀rna。用這種方法得到的總 rna中蛋白質和dna污染很少。
三、實驗材料
1. 材料
甘薯（ipomoea batatas lam）葉片，品種為徐薯18
2. 試劑
① 無rna酶滅菌水：加入0.01%的depc，處理過夜后高壓滅菌；
② trizol試劑；
③ 氯仿；
④ 異丙醇、75％乙醇；
⑤ tbe緩沖液；
⑥ 上樣緩沖液（6×）
3. 儀器
高壓滅菌鍋、微量移液器、臺式離心機、超凈工作臺、電泳儀、電泳槽、凝膠成像系統(tǒng)、1.5ml塑料離心管、槍頭和ep管架
四、實驗方法
1. 將葉片取出放入研缽中，加入適量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100 mg植物葉片加入1 ml trizol試劑，室溫放置5 min，使樣品充分裂解；
2. 每1 ml trizol試劑加入200 μl氯仿，用手劇烈振蕩混勻后室溫放置3-5 min使其自然分相；
3. 4℃ 12，000 rpm 離心15 min，吸取上層水相轉移到新管中；在上清中加入等體積冰冷的異丙醇，室溫放置15 min；
4. 4℃ 12，000 rpm 離心10 min，棄上清，rna沉淀于管底；
5. rna沉淀中加入1 ml 75%的乙醇（用rnase-free水配制），溫和震蕩離心管，懸浮沉淀； 4℃ 8，000 rpm離心2 min，棄上清；
6. 室溫放置10 min晾干沉淀；
7. 沉淀中加入20μl rnase-free ddh2o，輕彈管壁，以充分溶解rna，-70℃保存；
8. 用1%的瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，用eb染色并照相。
五、實驗結果
1. rna提取結果
依照trizol 試劑盒方法，提出的rna較少，此部分未以圖或數(shù)據(jù)顯示。
2. rna后電泳結果
如圖1. 其中9a為本組實驗結果。由圖可知rna條帶非常模糊，拖尾現(xiàn)象嚴重，幾乎無法分清具體條帶，亮度較大。點樣孔附近的紅色部分為雜質，在提取過程中并未很好除去。
圖1. rna提取跑膠結果。其中1泳道為樣品marker，9a泳道為本小組rna樣品。與標準對照可見條帶模糊，拖尾現(xiàn)象嚴重。
六、分析與討論
1. rna的提取
產量并不多，可能是因裂解樣品不充分或rna沉淀未完全溶解所致。在實驗過程中，由于對操作時間的掌握不熟練、操作技巧不完善，留上清與棄上清時令rna損失了部分，使最終rna產量不理想。
2. rna電泳結果
有eb存在時，電泳后28s rrna和18s rrna在紫外燈下應看得很清楚，另出現(xiàn)條由trna，5.8s rrna和5s rrna組成的較模糊、遷移較快的帶。如果
rna沒有降解，則28s rrna的亮度應為18s rrna的2倍，且這兩條帶都無彌散現(xiàn)象發(fā)生。由圖1. 9a可知，rna拖尾現(xiàn)象嚴重，說明rna已大部分被降解；此外點樣孔附近出現(xiàn)紅色部分雜質，分析可能有并未除盡的蛋白質，同樣影響rna電泳結果。
在進行實驗時，本小組成員未嚴格戴上口罩并勤換手套，這可能使外源
rnaase進入樣品，導致其降解嚴重。另外，提取出rna后本小組未立即將樣品放入-70℃保存，也為導致結果不理想的重要原因之一。在最初用氯仿萃取分層的過程中，由于水相吸取過多，摻雜入部分蛋白質雜質而未于后續(xù)純化步驟除盡，rna條帶拖尾嚴重可能還受該蛋白質影響。
七、總結：
本次試驗rna提取非常失敗，從跑膠結果可見其降解嚴重。雖然大實驗無法避免試劑交叉污染的可能性，且電泳用膠的質量也會影響實驗結果，但從圖
1. 2a，3a，2b等條帶較為清晰的小組實驗結果可知，瓊脂糖凝膠質量以及試劑對結果干擾不大。那么本小組成員在提取過程中的操作一定出現(xiàn)了很大失誤。首先口罩、手套應該嚴格按規(guī)定佩戴，提取過程對移液槍等儀器使用需謹慎仔細，盡量避免混入雜質。其次為排除部分雜質影響可對rna樣品用紫外線分光光度計測定吸光值檢驗，將有助于結果分析。最后，細節(jié)決定成敗，我們應汲取教訓避免接下來的實驗出現(xiàn)類似問題。
實驗二 第1鏈cdna的合成和模板的驗證
一、實驗目的
1. 掌握第1鏈cdna的合成方法和步驟
二、實驗原理
真核生物基因多為斷裂基因，編碼區(qū)不連續(xù)，需經轉錄后加工才能成為成熟mrna。以真核成熟mrna為模板合成cdna，進而獲得有連續(xù)氨基酸編碼的dna序列，無需轉錄后加工，即可在原核細胞中表達。
真核生物的mrna都有polya尾巴。引物：oligo dt（12-18個t）。莫洛尼
氏鼠白血病毒逆轉錄酶（m-mlv ）以單鏈rna為模板，在引物的引發(fā)下合成與模板互補的dna鏈（cdna）。
mrna 反轉錄生成的cdna可作為pcr的模板進行擴增稱為rt-pcr，rt-pcr比northern雜交更靈敏，對rna的質量要求較低，操作簡便，它是在轉錄水平上檢測基因時空表達的常用方法。
三、實驗材料
1. 材料
徐薯18葉片rna樣品
2. 試劑
① dntp mi_ture（10 mm each）；
② oligo (dt) primer (10 μm)；
③ total rna；
④ rnase free ddh2o；
⑤ m-mlv 反轉錄酶；
⑥ 5×first-strand buffer；
⑦ 0.1 m dtt；
⑧ ribonuclease inhibitor (40 u/μl)
3. 儀器
10μl 和100μl 的移液槍、0.5ml的ep管、pcr儀等
四、實驗方法
1. 在rnase free microtube 管中配制下列混合液：
dntp mi_ture（10 mm each）1 μl
_oligo (dt) primer (10 μm) 4 μl
total rna2 μl
